实验室怪谈:它来了!

摘要: 一起解密神秘鬼魅的灵异液相色谱图——鬼峰。

09-06 23:11 首页 安捷伦视界

这天夕阳西下,窗外天空一片晚霞格外红火,照的仪器的影子被拉得很长。一名实验员刚刚研究完成一个新的方法,满心欢喜地来到另一台正在分析的液相色谱的显示器前,检查谱图,一切都很正常,他正要准备下班,忽然觉得余光里有一丝异常。他再次凑近屏幕查看,意外发现谱图上出现一个莫名其妙的峰,它幽灵一样出现在了不该出现的地方。


实验员仔细回忆,反复确认,这里确实不应该出峰。那么这峰是从哪来的?是什么引起的?


他正要抬头问前辈,这才发现实验室空荡荡的只剩下他一个人,除了仪器运转的声音和他局促的呼吸声之外,一片寂静。此时白色仪器机体上映着的红霞变得更加妖冶,他起了一身鸡皮疙瘩,怎么偏偏这个时候碰到鬼峰!


他感觉后背阴风阵阵,走回刚刚开发方法的色谱仪前查看,谱图居然同样出了奇怪的峰。他慌忙进了一针空白进样,但是,鬼峰依然存在。


他大脑一片空白,心里不断重复一句话:“见鬼”了!



鬼峰,顾名思义如鬼魅般出现在不该出现的地方的峰。


当发现色谱图中莫名其妙出现鬼峰,无非就是流动相、仪器、样品几方面出现问题,逐个进行排查就可以“驱鬼”。


流动相不过关,很容易惹出鬼峰,而拆分来看,导致流动相不过关的,无非是水相、有机相和添加剂三部分。当流动相中有机相或水相质量存在问题时,梯度淋洗中通常会出现鬼峰,可通过换用另外一个品牌的色谱溶剂或实验用水来排查原因建议使用超纯水机来保证水的品质,有机相认准“色谱级(HPLC Grade)”;流动相中添加的缓冲盐或酸、碱也可能导致鬼峰的出现,请换新的或更高纯度级别的试剂;此外,流动相过滤液也会带来鬼峰,因为滤膜上可能存在的污染物在过滤过程中易被溶剂溶出,这时可比较不过滤和过滤的结果来进行排查,必要时更换质量更好或其它材质的滤膜


排查了流动相,就该到仪器了。仪器夜以继日的分析样品,它的污染也是导致鬼峰出现的重要原因。色谱柱最容易被污染,所以在使用色谱柱时最好确认色谱柱是否已经被清洗过了;进样器、针座或管路被污染了,请进行清洗或使用更强的洗针液。总而言之,如果是系统污染,那么建议采用洗脱能力强的溶剂冲洗系统,如果没有使用洗针程序,样品容易被另一个样品污染。


以上两种可能是该实验员碰到“鬼”的原因,除此之外,如果进样时谱图出现鬼峰,而空白进样时却没有,那问题可能出在样品上,溶解样品的溶剂存在杂质或在实验过程中被污染,而且样品本身在不适宜的条件下也有可能发生降解或变质。更加匪夷所思的情况就是序列运行时忽然从某一针开始有重现的鬼峰,可能是前面一针样品的组分没有完全被洗脱,在本次测试中流出,导致鬼峰出现,需要在流动相梯度中加冲柱程序。


参照上述几点逐一进行排查,实验员成功找到鬼峰出现的源头,消除鬼峰,让分析继续顺利进行。虚惊一场之后,他心满意足的回家,经历了这一场“驱鬼战役”,他再也不担心遇到鬼峰啦,就连走夜路都是一口气走回家,不费劲!




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